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在高通量單細胞測序實驗中,制備出高質量的單細胞懸液是實驗成功的關鍵,其影響因素諸多,如新鮮組織/細胞樣本是否得到妥當的保存、單細胞懸液制備試劑和方法是否高效、單細胞懸液是否能得到很好的優化等。
百奧醫藥團隊累積了10,000+個樣本的單細胞測序服務經驗,涉及150+種不同類型的組織,積累了豐富的新鮮組織保存、解離及優化經驗。
在此基礎上,百奧醫藥自主研發了單細胞測序系列試劑盒。利用該系列試劑盒,能妥當的保存新鮮組織/細胞樣本,能高效的制備出高質量的單細胞懸液,能很好的去除單細胞懸液中的細胞碎片、紅細胞,從而廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
整體總覽
系列分分類 |
產品名稱 |
產品貨號 |
產品簡介 |
組織/細胞保存系列試劑盒 |
百奧醫藥動物組織保存液試劑盒 |
BA3301 |
用于人和動物新鮮離體組織樣本保存,維持細胞的初始狀態。 |
百奧醫藥通用細胞凍存液試劑盒 |
BA3309 |
用于各種哺乳動物原代細胞、傳代細胞系和雜交瘤細胞等的凍存,復蘇后可較好的保持細胞存活率 |
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組織細胞制備系列試劑盒 |
百奧醫藥人腫瘤組織解離試劑盒 |
BA3303 |
用于人腫瘤組織樣本單細胞懸液制備 |
百奧醫藥骨組織解離試劑盒 |
BA3308 |
用于骨組織組織樣本單細胞懸液制備 |
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百奧醫藥血管組織解離試劑盒 |
BA3310 |
用于血管組織樣本單細胞懸液制備 |
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組織細胞優化系列試劑盒 |
紅細胞裂解試劑盒 |
BA3311 |
用于細胞懸液中紅細胞的快速高效去除 |
細胞碎片去除試劑盒 |
BA3304 |
用于快速高效的去除已破裂的細胞碎片 |
組織/細胞保存系列試劑盒
百奧醫藥動物組織保存試劑盒
一、產品介紹
本產品可用于人和動物新鮮離體組織樣本保存,在低溫條件下(0-4℃)能較好的保持離體組織細胞活性,維持細胞的初始狀態。適用于人、大小鼠等多種動物離體新鮮組織的單細胞懸液制備。保存后的組織樣本可直接用于單細胞懸液制備,可廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
產品貨號 |
產品名稱 |
產品規格 |
儲藏條件 |
220605 |
百奧醫藥動物組織保存液試劑盒 |
50ml |
4℃避光保存 |
二、測試效果
使用該組織保存液分別保存小鼠肺組織0小時、24小時、48小時,然后將該組織消化解離為單細胞懸液,利用CountStar全自動細胞熒光分析儀檢測細胞活性(AO/PI染色)、結團率、活細胞濃度、細胞直徑等參數,然后進行10x Genomics平臺單細胞建庫測序,獲取數據。
懸液質檢結果:圖3可以看出,未經保存的組織制備的單細胞懸液活性可達97.44%;保存24小時后活性仍可在90%以上,達到93.54%;保存48小時后活性為86.66%;同時,結團率等參數也均能滿足高通量單細胞測序研究相關實驗要求。
數據分析結果:從圖4曲線圖、捕獲細胞數、測序深度、獲得基因數結果初步可以看出,數據結果比較理想,并且重復性較好,不同保存時間組織得到基因中位數均在1,500個左右,也較為理想。
百奧醫藥通用細胞凍存試劑盒
一、產品介紹
本產品適用于各種哺乳動物原代細胞、傳代細胞系和雜交瘤細胞等的凍存,復蘇后可較好的保持細胞存活率,且儲存穩定,使用方便。復蘇后的細胞樣本可直接用于單細胞懸液制備,可廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
產品貨號 |
產品名稱 |
產品規格 |
儲藏條件 |
221220 |
百奧醫藥細胞凍存液試劑盒 |
50ml |
-20℃避光保存 |
二、測試效果
使用該細胞凍存液分別凍存PBMC樣本0天和7天,復蘇后利用CountStar全自動細胞熒光分析儀檢測細胞活性(AO/PI染色)、結團率、活細胞濃度、細胞直徑等參數,然后進行10x Genomics平臺單細胞建庫測序,獲取數據。
懸液質檢結果:圖6可以看出,細胞樣本凍存前懸液活性可達99.31%;凍存7天并復蘇后活性仍可在90%以上,達到94.66%。同時,結團率等參數也均能滿足高通量單細胞測序研究相關實驗要求。
數據分析結果:從圖7曲線圖、捕獲細胞數、測序深度、獲得基因數結果初步可以看出,數據結果比較理想,并且重復性較好,凍存前后細胞樣本得到基因中位數均在1,600個左右,也較為理想。
組織細胞制備系列試劑盒
百奧醫藥人腫瘤組織解離試劑盒
一、產品介紹
本產品可用于人腫瘤組織樣本單細胞懸液制備,可廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
產品貨號 |
產品名稱 |
產品規格 |
儲藏條件 |
BA3303 |
百奧醫藥人腫瘤組織解離試劑盒 |
10rxns |
-20℃避光保存 |
二、測試效果
使用該組織解離試劑盒將新鮮人結直腸癌組織消化解離為單細胞懸液,利用 CountStar全自動細胞熒光分析儀檢測細胞活性(AO/PI染色)、結團率、活細胞濃度、細胞直徑等參數,然后進行10x Genomics平臺單細胞建庫測序,獲取數據。
懸液質檢結果:圖9可以看出,制備的單細胞懸液質量較高,活性可達92.88%,結團率僅為1.44%,其他參數也均能滿足高通量單細胞測序研究相關實驗要求。
數據分析結果:從圖10曲線圖、捕獲細胞數、測序深度、獲得基因數結果初步可以看出,數據結果較好,例如基因中位數在2,400個左右,較為理想。
百奧醫藥骨組織解離試劑盒
一、產品介紹
本產品可用于骨組織樣本單細胞懸液制備,可廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
產品貨號 |
產品名稱 |
產品規格 |
儲藏條件 |
BA3308 |
百奧醫藥骨組織解離試劑盒 |
16rxns |
-20℃避光保存 |
二、測試效果
使用該組織解離試劑盒將新鮮人骨組織消化解離為單細胞懸液,利用 CountStar 全自動細胞熒光分析儀檢測細胞活性(AO/PI染色)、結團率、活細胞濃度、細胞直徑等參數,然后進行 10x Genomics 平臺單細胞建庫測序,獲取數據。
懸液質檢結果:圖12可以看出,制備的單細胞懸液質量較高,活性可達83.85%,結團率僅為3.35%,其他參數也均能滿足高通量單細胞測序研究相關實驗要求。
數據分析結果:從圖13曲線圖、捕獲細胞數、測序深度、獲得基因數結果初步可以看出,數據結果較好,例如基因中位數均在1,400個左右,較為理想。
百奧醫藥血管組織解離試劑盒
一、產品介紹
本產品可用于血管組織樣本單細胞懸液制備,可廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
產品貨號 |
產品名稱 |
產品規格 |
儲藏條件 |
BA3310 |
百奧醫藥血管組織解離試劑盒 |
10rxns |
-20℃避光保存 |
二、測試效果
使用該組織解離試劑盒將新鮮小鼠動脈組織消化解離為單細胞懸液,利用 CountStar 全自動細胞熒光分析儀檢測細胞活性(AO/PI染色)、結團率、活細胞濃度、細胞直徑等參數,然后進行 10x Genomics 平臺單細胞建庫測序,獲取數據。
懸液質檢結果:圖15可以看出,制備的單細胞懸液質量較高,活性可達80.56%,結團率僅為7.42%,其他參數也均能滿足高通量單細胞測序研究相關實驗要求。
數據分析結果:從圖16曲線圖、捕獲細胞數、測序深度、獲得基因數結果初步可以看出,數據結果較好,例如基因中位數均在1,500個左右,較為理想。
組織細胞優化系列試劑盒
百奧醫藥紅細胞裂解試劑盒
一、產品介紹
本產品可用于細胞懸液中紅細胞的快速高效去除,在裂解紅細胞的同時幾乎不傷害其他淋巴細胞或其他有核的細胞,可廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
產品貨號 |
產品名稱 |
產品規格 |
儲藏條件 |
BA3311 |
百奧醫藥紅細胞裂解試劑盒 |
50ml |
-20℃避光保存 |
二、測試效果
使用該紅細胞裂解試劑盒處理新鮮制備的人PBMC樣本,利用CountStar全自動細胞熒光分析儀分別對處理前后的樣本的細胞活性(AO/PI染色)、結團率、活細胞濃度、細胞直徑等參數進行質檢,然后進行10x Genomics平臺單細胞建庫測序,獲取數據。
懸液質檢結果:從細胞直徑分布圖(圖19)可以看出,紅細胞裂解處理后,紅細胞的分布明顯減少,單細胞懸液的有核率參數也從32.4%提升至92.6%(表1),并且活性也得到明顯改善。
數據分析結果:從圖20數據結果可以看出,紅細胞裂解處理后,測得的基因中位數明顯改善,從497提升至1,666。
表1 利用紅細胞裂解試劑盒處理單細胞懸液前后樣本有核率
處理方式 |
紅細胞裂解前 |
紅細胞裂解后 |
有核率 |
32.4% |
72.6% |
百奧醫藥細胞碎片去除試劑盒
一、產品介紹
本產品可用于快速、高效的去除已破裂的細胞碎片,經細胞碎片試劑盒處理得到的細胞懸液,可廣泛應用于高通量單細胞測序等相關科學研究實驗。
產品貨號 |
產品名稱 |
產品規格 |
儲藏條件 |
BA3304 |
百奧醫藥細胞碎片去除試劑盒 |
50ml |
4℃避光保存 |
二、測試效果
使用該細胞碎片去除試劑盒處理新鮮制備的小鼠腦組織細胞懸液樣本,利用CountStar全自動細胞熒光分析儀分別對處理前后的樣本的細胞活性(AO/PI染色)、結團率、活細胞濃度、細胞直徑等參數進行質檢,然后進行10x Genomics平臺單細胞建庫測序,獲取數據。
懸液質檢結果:從細胞直徑分布圖(圖23)可以看出,細胞碎片去除處理后,懸液中細胞碎片的分布明顯減少,單細胞懸液的有核率參數明顯提升,從35.7%提升至92.1%(表2)。
數據分析結果:從圖24數據結果可以看出,細胞碎片去除處理后,測得的基因中位數明顯改善,從728提升至2,461。
表2 利用細胞碎片去除試劑盒處理單細胞懸液前后樣本有核率
處理方式 |
紅細胞裂解前 |
紅細胞裂解后 |
有核率 |
35.7% |
92.1% |